Съдържание
- етапи
- Метод 1 Наблюдавайте бактериите директно
- Метод 2 Измерване на биомаса
- Метод 3 Продължете с турбидиметрия
Има няколко начина за измерване на растежа на бактериите, а някои от тях са по-трудни от други. Най-простите се използват обикновено и дават сравнително точни резултати, при условие че са строги по време на измерванията. Най-често срещаните техники са наблюдение и броене на бактерии, измерване на биомаса и суха биомаса и турбидиметрия. Вашата училищна лаборатория трябва да разполага с оборудването, необходимо за поне един от тези методи.
етапи
Метод 1 Наблюдавайте бактериите директно
-
Подгответе оборудването. В допълнение към това, което обикновено се намира във всички лаборатории по биология, ще ви трябват някои конкретни елементи. Уверете се, че разполагате с всички инструменти и контейнери под ръка, за да не се налага да се връщате напред и назад в килера, където се съхранява оборудването. Помислете предварително какво ще направите, за да знаете какво ще използвате на всеки етап. Ще трябва да знаете и някои ключови термини.- Получете хемацитометър. Това е острие с камери за номериране, което е свързано с микроскоп. Това е много лесен инструмент за настройка и използване. Можете да намерите някои от доставчиците, специализирани в оборудване за училища и изследователски лаборатории. Обикновено се предоставя ръководство за употреба.
- Вземете петричка. Това е малък, кръгъл, плитък контейнер, в който можете да наблюдавате бактерии.
- Терминът "култура" се отнася до микроорганизъм, който изкуствено се размножава като част от научен експеримент.
- „Бульонът на културата“ е средата, в която културата ще се развива.
-
Използвайте петрито. Поставете бактериите в кутията и я наблюдавайте под микроскоп. Можете също да го поставите директно върху слайд. След това пребройте броя на присъстващите бактериални клетки. -
Уверете се, че имате правилната концентрация. Ако има твърде много бактерии, те ще се припокриват и няма да можете да ги преброите правилно. В такъв случай разредете културата, като я смесите с малко бульон. Ако са твърде малко, резултатът няма да бъде значителен. След това трябва да филтрирате бульона, за да увеличите концентрацията. -
Пребройте бактериите. Последната стъпка е просто да преброите. Погледнете преброяващите камери под микроскопа и отбележете броя на клетките, които виждате. Сравнете резултата с други подобни преживявания.
Метод 2 Измерване на биомаса
-
Проверете дали имате необходимите инструменти. Този метод е бавен за изпълнение и включва използването на скъпо оборудване. Ако не го миете, използвайте друга техника. От друга страна, ако лабораторията, в която се намирате, разполага с подходящите инструменти, измерването на биомаса и суха маса е идеално, защото дава точни резултати. Трябва:- хидравлична фурна с принудителна конвекция,
- алуминиева теглилка,
- няколко колби от Ерленмайер,
- центрофуга или лабораторна система за филтриране.
-
Проверете дали реколтата е в ерленмайерова колба. Ако това не е така, изсипете го. На този етап от експеримента бактериите все още са в хранителния бульон. Те ще бъдат разделени по-късно. -
Изсушете тенджерата за претегляне. За това го поставете във фурната. Можете също така да използвате мембранен филтър с целулозен ацетат с диаметър 47 мм с пори 0,45 µm. Който и инструмент да се използва, измерете точно неговата маса, така че да може да се извади от резултатите, които получавате, когато културата е поставена върху нея. -
Mix. Разбърквайте lerlenmeyer, така че културата да е хомогенна. Всъщност, поради гравитацията, клетките естествено имат тенденция да падат на дъното на контейнера. Така че трябва да разклатите малко, за които са разпределени по еднакъв начин и че вашата проба е по-представителна. -
Центрофуга. С помощта на центрофугата отделете бактериите от хранителния бульон. Това устройство се използва за завъртане на контейнера и противотежест с много висока скорост. Бульонът тече, който поддържа само жива материя. За повече информация ще намерите информация как да използвате центрофуга в интернет. -
Вземете тестото. Пуснете го на тенджерата за претегляне. Можете да хвърлите бульона за култура, вече няма да ви е нужен, но дръжте lerlenmeyer под ръка. -
Изплакнете центрофугата. Изсипете водата за изплакване върху теглото в допълнение към бактериалните клетки. Резултатът, получен за всичко, ви дава биомаса. -
Намерете сухата маса. За да знаете сухата биомаса на вашата проба, поставете претеглящия съд във фурната на 100 ° C за период от 6 до 24 часа, в съответствие с инструкциите, предоставени с вашето устройство. Внимавайте да не превишавате тази температура, за да избегнете изгарянето на бактерии. След това претеглете всичко, след което извадете масата на тавата.
Метод 3 Продължете с турбидиметрия
-
Подгответе оборудването си. Ще ви трябва източник на светлина и спектрофотометър, устройство, открито в повечето научни лаборатории. Вижте приложеното ръководство за употреба, тъй като всеки модел има своя собствена работа. Този метод е един от най-често използваните за измерване на растежа на бактериите, тъй като изисква само евтини и лесни за употреба инструменти. -
Внесете светлина в културата. Мътността се използва за оценка на съдържанието на течност в частици, тя се определя, ако е повече или по-малко мътна. Резултатът, който ще получите от това измерване, ще бъде даден в NTU (или Нефелометрични единици за мътност). Може да е необходимо да се извърши калибриране на устройството, за да се измери точно мътността на пробата. -
Водете си бележки. Мътност е количеството бактерии в пробата. Спектрофотометърът също ще ви позволи да знаете коефициента на пропускане на разтвора (% T), чиято стойност е обратно пропорционална на тази на мътността. След това сравнете резултатите, получени на различни проби, за да измерите растежа на бактериите.